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在臨床病理檢測(cè)中,液基細(xì)胞保存液是保障樣本質(zhì)量的關(guān)鍵耗材。其核心功能是通過(guò)維持細(xì)胞形態(tài)完整、減少微生物繁殖,為后續(xù)的細(xì)胞學(xué)分析提供可靠基礎(chǔ)。然而,實(shí)際使用中因操作不規(guī)范導(dǎo)致的樣本污染、細(xì)胞變形等問(wèn)題屢見(jiàn)不鮮。本文將系統(tǒng)梳理從樣本采集到檢測(cè)前的全流程操作規(guī)范,聚焦常被忽視的技術(shù)細(xì)節(jié)。
樣本采集階段的“黃金3分鐘”
采集后需在3分鐘內(nèi)完成樣本轉(zhuǎn)移,超過(guò)該時(shí)間窗口,細(xì)胞膜通透性將發(fā)生不可逆改變。建議使用帶有預(yù)置保存液的采樣器,避免空氣接觸引發(fā)的細(xì)胞自溶。若采用傳統(tǒng)玻片采集,轉(zhuǎn)移時(shí)需垂直浸入保存液,傾斜角度超過(guò)15°會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞堆積,影響后續(xù)制片均勻性。
保存液選擇的“隱形門(mén)檻”
不同檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)保存液成分有差異化要求。進(jìn)行HPV分型檢測(cè)時(shí),需選用含螯合劑的保存液,以消除血液中的金屬離子干擾;而用于尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查時(shí),應(yīng)選擇低滲配方,防止細(xì)胞過(guò)度收縮。值得關(guān)注的是,保存液與樣本的體積比需嚴(yán)格控制在1:5至1:10之間,比例失衡會(huì)直接影響細(xì)胞分散度。
操作規(guī)范的“毫米級(jí)”要求
在混勻樣本時(shí),需采用“上下翻轉(zhuǎn)8次+水平旋轉(zhuǎn)10秒”的組合動(dòng)作,力度過(guò)猛會(huì)造成細(xì)胞破裂,力度不足則導(dǎo)致結(jié)團(tuán)。離心環(huán)節(jié)的轉(zhuǎn)速控制尤為關(guān)鍵,建議設(shè)置1500rpm持續(xù)5分鐘,轉(zhuǎn)速波動(dòng)超過(guò)±50rpm將顯著影響沉降效果。這些細(xì)節(jié)在設(shè)備SOP中常被簡(jiǎn)化為“充分混勻”,導(dǎo)致操作誤差。
存儲(chǔ)運(yùn)輸?shù)摹皽囟认葳濉?/p>
液基保存液并非越低溫越好。短期存儲(chǔ)(≤7天)建議4℃冷藏,長(zhǎng)期存儲(chǔ)需-20℃冷凍,但需注意復(fù)溫時(shí)需在25℃環(huán)境靜置2小時(shí),避免溫差驟變引發(fā)細(xì)胞膜破裂。運(yùn)輸過(guò)程中,保溫箱需配備實(shí)時(shí)溫濕度記錄儀,數(shù)據(jù)間隔不得超過(guò)15分鐘,確保全程可追溯。
質(zhì)量監(jiān)控的“微觀指標(biāo)”
除了常規(guī)的pH值和微生物檢測(cè),還需關(guān)注保存液的粘度變化。使用旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)在25℃環(huán)境下檢測(cè),合格范圍應(yīng)為1.2-1.8mPa·s。當(dāng)粘度低于1.2mPa·s時(shí),提示可能發(fā)生水解變質(zhì);高于1.8mPa·s則會(huì)影響細(xì)胞分散。這些指標(biāo)在常規(guī)質(zhì)檢中常被忽視,卻是保障檢測(cè)一致性的關(guān)鍵。
液基細(xì)胞保存液的規(guī)范使用是病理質(zhì)控的起點(diǎn)。從接觸樣本的瞬間到進(jìn)入檢測(cè)流程,每個(gè)操作細(xì)節(jié)都需建立量化標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室可通過(guò)制作標(biāo)準(zhǔn)化操作視頻、配備帶刻度的混勻計(jì)時(shí)器、引入粘度快速檢測(cè)卡等工具,將文本規(guī)范轉(zhuǎn)化為可執(zhí)行的流程控制點(diǎn),真正實(shí)現(xiàn)樣本質(zhì)量的全程可控。
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